آموزش

رنگ آمیزی PAS

ارسال شده در تاریخ توسط didsabz_admin
رنگ آمیزی PAS

رنگ آمیزی PAS  (Periodic acid Schiff)

این نوع رنگ آمیزی باعث رنگ آمیزی گلیکوژن موجود در بافت میشود بنابراین برای بررسی غشاءهای مخاطی همچنین وجود قارچ ها استفاده میشود. فرایند رنگ آمیزی PAS معمولا دارای دو مرحله میباشد. مرحله ی اول  فرایند اکسیداسیون با پریودیک اسید که منجر به تشکیل آلدئید ها میشود و مرحله ی دوم نمایش این آلدئیدها با استفاده از معرف محلول شیف.

رنگ فوکسین در معرف شیف، طیف وسیعی از رنگ ها از سرخابی تا بنفش را نشان میدهد.

پروتکل رنگ آمیزی  PAS (Periodic Acid Schiff)برای تشخیص گلیکوژن در بافتهایی مانند کبد ، عضلات قلبی و اسکلتی که در  پارافین تعبیه شده و با فرمالین فیکس شده اند استفاده می شود و همچنین ممکن است برای برش های فروزن سکشن نیز استفاده شود.

0.5% Periodic Acid Solution

Periodic -0.5 g

Distilled water -100 m

Schiff’s reagent

schiff’s reagent: Fisher Scientific (cat: 50-301-27)

آزمایش برای معرف شیف:

10 میلی لیتر فرمالین 10 درصد را در یک لیوان بریزید ، چند قطره از معرف شیف را برای آزمایش اضافه کنید. معرف شیف با کیفیت خوب به سرعت به رنگ بنفش مایل به قرمز در می آید. واکنش معرف شیف نامناسب با تاخیر واکنش می دهد و رنگ تولید شده مایل به  آبی پر رنگ خواهد بود

Mayer’s modified hematoxylin: Fisher Scientific (cat: NC9220898)

روش انجام رنگ آمیزی:

  1. بافت را پارافین زدایی کرده و با آب هیدراته کنید.
  2. به مدت 5 دقیقه در محلول periodic acid 0.5% اکسیدایز کنید.
  3. در سه بار غوطه وری با آب مقطر شستشو دهید.
  4. به مدت 15 دقیقه در معرف شیف قرار دهید.( در این مرحله برش ها به رنگ صورتی روشن در می آیند.)
  5. به مدت 5 دقیقه با آب لوله کشی شستشو دهید.( برش ها فورا به صورتی پر رنگ تغییر رنگ میدهند)
  6. در محلول Mayer’s hematoxylin به مدت 1 دقیقه کانتراستینینگ کنید.
  7. به مدت 5 دقیقه توسط آب لوله کشی سپس با آب مقطر شستشو دهید.
  8. آبگیری کرده و برش هارا روی اسلایدها با چسب مخصوص قرار دهید.

نتیجه ی فرایند:

  • گلیکوژن، موسین و برخی غشاء های مایع …………………..رنگ قرمز/بنفش
  • قارچ ها ………………………………………………………………………… رنگ قرمز/بنفش
  • زمینه………………………………………………………………………………رنگ آبی

توجه: تشخیص فقط باید توسط افراد متخصص انجام گیرد همچنین هر برنامه باید شامل مراحل کنترلی برای رد نتایج اشتباه و جلوگیری از تشخیص نادرست باشد.

رنگ آمیزی PAS
مزوتلیوم بدخیم ، پلور افیوسون: گرانولهای فراوان گلیکوژن

روش های دیگر رنگ آمیزی اختصاصی و عمومی بافت را از لینک زیر مطالعه کنید.

کلیک کنید!

منابع:

پرسش های دیدسبز

  • برای چه نوع بافت هایی از رنگ آمیزی PAS استفاده میکنید؟

  • تاکنون در انجام این روش با چه مشکلاتی مواجه شده اید؟

* لطفا نظرات خود را با ما به اشتراک بگذارید.

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *