برش بافت

روش و نحوه ی برش بافت، نحوه استفاده از تیغ و زاویه تیغ:

برش بافت توسط میکروتوم انجام می شود. میکروتوم انواع مختلفی دارد ولی میکروتومی که معمولا در آزمایشگاه بکار میرود از نوع میکروتوم دوار (Rotatory Microtome) است که در آن دسته حرکت دورانی دارد. در این نوع میکروتوم تیغ ثابت و بافت متحرک است.

توجه:

به منظور تشخیص فوری آسیب شناسی و برش بافت های چربی و مطالعه بر روی آنزیم های داخل سلولی بهتر است از میکروتوم Cryostate استفاده شود و برش انجمادی صورت گیرد چرا که چربی در روش های معمولی در الکل و گزیلل حل می شود ولی در برش انجمادی سالم باقی می ماند.

جدول1-انواع بافت های انسانی و حداکثرضخامت برش آن ها

برای مطالعه بیشتر در مورد انواع بافت ها ، روی لینک زیر کلیک کنید.

بافت ها

روش انجام کار:

• قبل از برش باید بلوک بافتی را مرتب و تنظیم کرد.
• بلوک را در شکاف قالب گیر قرار داده و با پیچی آن را در جای خود محکم میکنیم.
• تیغ را در جای مخصوص خود قرار داده و آن را طوری تنظیم میکنیم که لبه تیغ موازی با سطح برش باشد.
• دسته را با حرکت دورانی می چرخانیم بلوک در حالیکه به بالا و پایین حرکت میکند به تیغ میرسد بطوریکه سطح بلوک در مقابل لبه تیغ یکنواخت قرار بگیرد. سرعت دوران در برش بافت از اهمیت بالایی برخوردار است به اینصورت که برای برش بافتهای نرم یا نیمه سخت از دوران کند و در بافتهای سخت کمی تند است.
• پیچ و مهره های مربوط به تیغ و بلوک باید کاملا محکم شوند
• باید آنقدر از سطح بلوک برید تا کاملا تمام سطح بافت در برش قرار گیرد
• پیچ تنظیم ضخامت برش را تنظیم میکنیم. دکمه تنظیم میکرون از 0.5 تا 60 میکرون است که معمولا برای بافتهای نرم از 4 میکرون و برای بافتهای سخت از 5 میکرون استفاده می شود.
• زاویه برش را تنظیم میکنیم. مجموعه تیغ نگهدار شامل دو بخش رویی و زیرین است که بخش رویی دارای زاویه می باشد که بین 5 تا 25 درجه تنظیم می شود، هر میزان زاویه بیشتر باشد پشت تیغ خالی می ماند، تنظیم خوب و پیشنهادی زاویه 7 درجه است.

توجه:

اگر زاویه برش کمتر از 5 درجه باشد به جای تیغ برش پشت تیغ با بافت تماس پیدا خواهد کرد و در نتیجه برش انجام نمی شود.

توجه:

در بافتهای لنفوئیدی زاویه تیغ نباید بزرگتر از 10 درجه باشد (7 یا 8 درجه) و برش باید خیلی آرام انجام شود.

توجه:

در برش بافتهای سخت بهتر است زاویه تیغ 15 درجه باشد.

شکل1-دستگاه میکروتوم نیمه اتوماتیک مدل 9209 DS دیدسبز

 

برای مشاهده مقاله ی مشکلات برشگیری با میکروتوم و بررسی علل این مشکلات روی دکمه ی زیر کلیک کنید.

Click me!